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大鼠外周血淋巴細胞分離液試劑盒性能特點
點擊次數(shù):613 更新時間:2024-10-11

大鼠外周血淋巴細胞分離液試劑盒

貨號:YJ-P8630

價格: 1080.0

規(guī)格: 200ml

產(chǎn)品介紹

有效期

2年

儲存條件

RT,避光

外觀(性狀)

  液體    

單位

規(guī)格

200ml

本分離液為Ficoll、羥乙基淀粉550與泛影酸葡甲胺的混合液。抗凝外周血可在分離液中分層。離心時,在Ficoll、羥乙基淀粉的作用下紅細胞與粒細胞聚集并迅速沉降;此時,淋巴細胞及其他單個核細胞仍處于分離液上層,紅細胞污染可忽略不計。大部分血小板可在細胞清洗低速離心過程中去除。 其他人及動物多種比重細胞分離液,因不同種屬不同比重分離液的細胞離散系數(shù)及細胞帶電不同,用戶在制定分離液時應(yīng)提供所需分離液的比重、動物種屬及被分離細胞的名稱。

適用于從動物抗凝血液中分離淋巴細胞,無菌條件下所分離的淋巴細胞可用于細胞培養(yǎng)等。本品僅供科研使用。

密度:1.0830±0.0001g/ml

本品易感染細菌,需無菌條件操作。無菌條件下操作,啟封后置常溫保存。如 4℃保存,本分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶,影響分離效果。

產(chǎn)品內(nèi)容:

各種動物外周血淋巴細胞分離液 200mL

全血及組織稀釋液 200mL

細胞洗滌液 200mL

保存:18℃-25℃保存,有效期兩年。本品易感染細菌,需無菌條件下操作。無菌條件下操作,啟封后常溫保存。如4℃保存,本分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶,影響分離效果。

操作步驟:

1. 取新鮮抗凝全血(EDTA、枸櫞酸鈉或肝素抗凝均可)或者去纖維蛋白血液,用等體積的全血及組織稀釋液或者PBS稀釋全血。

2. 在離心管中加入適量分離液(當(dāng)稀釋后血液體積小于3mL時,加入3mL分離液;大于等于3mL,加入等體積分離液。但二者的總體積不能超過離心管的三分之二,否則會影響分離效果),將稀釋后的血液平鋪到分離液液面上方,注意保持兩液面界面清晰。(可以使用巴氏德吸管吸取血液,然后將血液小心的平鋪于分離液上,因為兩者的密度差異,將形成明顯的分層界面。如果樣品較多加樣時間較長,在離心之前出現(xiàn)紅細胞成團下沉屬正常現(xiàn)象。)

3. 室溫,水平轉(zhuǎn)子500~1000g,離心20~30min(血液的體積越大所需的離心力越大,離心時間越長,最佳的分離條件需摸索,離心轉(zhuǎn)速最大不超過1200g)。

4. 離心后將出現(xiàn)明顯的分層:最上層是稀釋的血漿層,中間是透明的分離液層,血漿與分離液之間的白膜層即為淋巴細胞層,離心管底部是紅細胞與粒細胞。

5. 小心的吸取白膜層細胞到15mL潔凈的離心管中, 10mL PBS或細胞洗滌液洗滌白膜層細胞。250g,離心10min。

6. 棄上清,5mL的PBS或細胞清洗液重懸細胞,250g,離心10min。

7. 重復(fù)步驟6

8. 棄上清,細胞重懸備用。

注意事項:

A. 開封前顛倒混勻,本分離液為無菌產(chǎn)品,為延長分離液保存時間,請在無菌條件下啟封,避免微生物污染。。

B. 分離液使用時應(yīng)始終保持室溫(18℃~25℃),如室內(nèi)溫度較低,可將分離液預(yù)熱。4℃或者是溫度較低的條件下離心,可能會導(dǎo)致白膜層中紅細胞污染加重。

C. 血液樣本最好為新鮮抗凝血(采血2 h以內(nèi)),為保持淋巴細胞的活性,應(yīng)避免冷凍和冷藏。

D. 稀釋血液或洗滌細胞,不可使用含Ca、Mg離子的緩沖液及培養(yǎng)液,其成分會導(dǎo)致血細胞凝集,大大降低細胞得率及純度。

E. 部分塑料制品(如聚苯乙烯)因其帶有的靜電作用,可能會導(dǎo)致細胞掛壁,影響分離效果。

F. 血液樣本的粘稠度或者是溫度差異,可能會影響分離效果,可以調(diào)節(jié)離心轉(zhuǎn)數(shù)和離心時間,摸索最佳的分離條件。

G. 吸取過多的淋巴細胞層及分離液層會導(dǎo)致分離液交界處的粒細胞被吸出從而使混雜的粒細胞數(shù)量增加;吸取過多的血漿層可能會導(dǎo)致淋巴細胞中血漿蛋白及血小板污染。

H. 如果要進一步對分離的細胞進行培養(yǎng),那在收集血液和分離過程中,注意無菌操作,避免微生物污染。

I. 不同動物血液在不同比重分離液中的細胞離散系數(shù)及細胞帶電不同,用戶在制定分離液時應(yīng)提供所需分離液的比重、動物種屬及被分離細胞的名稱。

注意事項

1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請勿存放于普通住宅區(qū)。

2. 為了您的安全和健康,請穿好實驗服并佩戴一次性手套和口罩操作。

2011年開始我們致力于在生命科學(xué)領(lǐng)域生物醫(yī)學(xué)實驗技術(shù)及論文潤色服務(wù),協(xié)助客戶各類實驗服務(wù)及論文潤色十多年,是您值得信賴的科研合作伙伴!

如果您受時間、試驗條件等限制而無法完成您的課題研究,歡迎您與我們聯(lián)系。

實驗技術(shù)服務(wù):



滬公網(wǎng)安備 31011802001676號

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