99久久久无码国产 I 久艹av I 国产精品第108页 I 东京天堂热av I 丝袜 国产 日韩 另类 美女 I 国产自在自线午夜精品视频 I 动漫精品h I 男女差差差视频 I 亚洲第一偷拍网 I 公交车上的激情小说 I 无遮18禁在线永久免费观看挡 I 欧美性做爰猛烈叫床潮 I 色就是色.com I 精品综合在线 I 911国语对白 I 中文字幕在线观看三区 I 亚洲制服丝袜一区 I 日批视屏 I 在线观看视频www I 泽村玲子av I 日韩美女一级视频 I 另类欧美视频 I 日韩人妻无码免费视频一区二区 I 岛国精品在线 I 亚洲欧美一区二区三区三高潮 I 调教母狗视频 I 九九热在线看 I 丁香六月婷婷激情 I 五月天av网站 I 欧美全黄视频 I 狂野欧美一区二区 I 无码专区无码专区视频网站 I 男人天堂色 I 另类小说综合网 I 久久精品囯产精品亚洲 I 久久婷香 I www.羞羞答答在线观看蜜桃臀 I 日本高清网址 I 国产人人干 I wwwyjizcom性欧美 I 麻豆 一区 I 免费的三级网站 I 狠狠干亚洲色图 I 成人区精品一区二区 I 午夜三级在线播放 I 国产ts人妖一区二区 I 91狠狠综合久久久 I 亚洲喷潮 I 福利 久久 I 极品少妇8mav I 国语对白一区二区 I 狠狠综合一区 I 国产大学生一区 I 日本乱偷人妻中文字幕在线 I 色综合色 I 2018年秋霞无码片 I 久久综合亚洲色一区二区三区 I 国产盗摄spa精品 I 国产在线网站 I 日韩成人久久 I 大屁股人妻女教师撅着屁股 I bsian正版色妇肉体pics I 给我免费播放片在线观看

本試劑盒只能用于科學(xué)研究，不得用于醫(yī)學(xué)診斷

大鼠（Rat）抗凝血酶3（AT-III）ELISA檢測(cè)試劑盒使用說明書

檢測(cè)原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被抗凝血酶3（AT-III）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的抗凝血酶3（AT-III）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測(cè)定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。

樣品收集、處理及保存方法

1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

3.  細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

5.  保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

自備物品

1. 酶標(biāo)儀（450nm）

2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒溫箱

操作注意事項(xiàng)

1.  試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶，這屬于正常現(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。

2.  實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。

3.  濃度為0的S0號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對(duì)照或者空白；按照說明書操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋5倍，最終結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。

4.  嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。

5.  所有液體組分使用前充分搖勻。

試劑盒組成

注：標(biāo)準(zhǔn)品（S0-S5）濃度依次為：：0、25、50、100、200、400 ng/mL

試劑的準(zhǔn)備

 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。

洗板方法

1.  手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。

2.  自動(dòng)洗板機(jī)：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。

操作步驟

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；

3.  樣本孔先加待測(cè)樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；空白孔不加。

4.  除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.  棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。

6.  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測(cè)定各孔的OD值。

結(jié)果判斷

 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：在Excel工作表中，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)OD值作縱坐標(biāo)，繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線，按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。

試劑盒性能

1.  準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。

2.  靈敏度：最DI檢測(cè)濃度小于1.0 ng/mL。

3.  特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

4.  重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

5.  貯藏：2-8℃，避光防潮保存。

6.  有效期：6個(gè)月

實(shí)驗(yàn)代做服務(wù)：