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產品展示Products
SILAC代謝標記定量實驗服務
SILAC代謝標記定量實驗服務
更新時間:2025-02-18
訪問量: 2671
廠商性質: 生產廠家

提供商: 上海研謹生物
服務名稱: SILAC代謝標記定量實驗服務
規格: 實驗服務
價格: 500元
收費標準/服務周期/提供結果:
歡迎咨詢詳談,我們會根據您的方案及需求制定詳細的服務協議。
更多實驗技術服務請瀏覽網站其他內容,或來電詳詢!

SILAC代謝標記定量實驗服務產品概述:

SILAC代謝標記定量實驗服務

 

實驗技術簡介: SIL AC的基本原理是分別用天然同位素(輕型)或穩定同位素(重型)標記的必需氨基酸取代細胞培養基中相應氨基酸,細胞經5-6個倍增周期后,穩定同位素標記的氨基酸*摻入到細胞新合成的蛋白質中替代了原有氨基酸。不同標記細胞的裂解蛋白按細胞數或蛋白量等比例混合,經分離、純化后進行質譜鑒定,根據一級質譜圖中兩個同位 素型肽段的面積比較進行相對定量。屬于體內代謝標記法。

實驗操作流程:

1、蛋白提取和樣品制備

2、標記效率測試

3、樣品混臺

4、SDS-PAGE分級

5、酶解

6、質譜鑒定

7、軟件分析

8、定性定量蛋白質組結果

9、生物信息學數據挖掘和統計分析

 

實驗注意事項:

客戶提供:

1、蛋白質提取物: 濃度>1μg/ul, 蛋白質總量>300μg.

2、細胞:通過細胞計數取不少于2x106個細胞于EP管,加入0 5ml生理鹽水或蛋白保護劑,混勻后保存于冰箱(-80°C, 避免反復凍融)。

交付標準:

1、蛋白質鑒定和SIL AC定量分析結果;

2、客戶指ding蛋白質對應的質譜峰圖;

3、SIL AC實驗完整的實驗步驟、使用儀器、軟件檢索參數等。

其他:

1、SILAC是體內標記技術,穩定同位素標記的氨基酸與天然氨基酸化學性質基本相同,所標記的細胞和未標記細胞在生物學行為上幾乎沒有差異,標記效率可高達100%。

2、采用質譜定量,定量結果準確且批次變異小、重復性好。

3、體內代謝標記與SDS- PAGE或色譜分離技術相結合,兼容疏水性蛋白和偏堿性蛋白,不受蛋白性質限制。

4、多個樣品混合后同時進行分離、酶切和鑒定,后續實驗對樣品的影響一致, 減少了實驗操作和儀器設備產生的影響。

5、由于該技術屬于體內標記,標記效果穩定,其標記效率不受裂解液的影響,不僅適合于進行全細胞蛋白的分析,還適合于膜蛋白的鑒定和定量。

6、與化學標記相比,SIL AC方法蛋白需要量明顯減少,通常每個樣品只需要幾十微克的蛋白量。

7、活體標記,更接近樣品真實狀態。

8、只適用于活體培養的細胞,對于生物醫學研究中常用的組織樣品,體液樣品等無法分析,對于動物模型的標記成本太大,無法實現。與體外標記技術相比,SIL AC屬于體內標記,具有以下技術優勢

1、高通量,可同時鑒定并定量數百至數千種蛋白質;

2、定量精*&確,降低由于樣品制備不同而造成的實驗差異;

3、線性定量范圍廣;

4、靈敏度更高,蛋白質需要量明顯減少;

5、標記采用的是體內標記技術,更接近樣品真實狀態。

SILAC技術服務內容

1、細胞同位素標記;

3、SDS-PAGE分離;

4、胰酶酶切后液相分離和質譜分析;

5、數據庫檢索及蛋白質定量分析;

6、差異蛋白的生物信息學分析;

7、實驗報告提交。

實驗服務報告內容

1、蛋白定鑒定和SIL AC定量分析結果;

2、顧客指ding蛋白質對應的質譜峰圖;

3、SIL AC實驗完整的實驗步驟、使用儀器、軟件檢索參數等。

技術服務優勢

1、靈敏度高,檢測限低,可檢測出低豐度蛋白;

2、分離能力強,分析范圍廣,iITRAQ可以對任何類型的蛋白質進行分離鑒定,包括高分子量蛋白質、酸性蛋白和堿性蛋白,膜蛋白和不溶性蛋白;

3、高通量:同時對8個樣本進行分析,提高了實驗通量,可同時對多個時間點或不同處理的蛋白質進行分析;

4、結果可靠:定性與定量分析結果更加可靠;

5、自動化程度高:液相與質譜連用,自動化操作,分析速度快,分離效果好。

 

 

實驗代做服務:

 

免疫組化IHC染色實驗服務

細胞、組織TUNEL凋亡染色實驗服務

試劑盒免費代檢測

實驗室代做實驗項目

 

透射電鏡服務實驗服務

石蠟/冰凍切片TUNEL凋亡

核仁組成區嗜銀-AGNOR染色實驗服務

免疫共沉淀(CHIRP)實驗

RNA結合蛋白免疫沉淀(RIP)實驗代做

酶聯免疫(ELISA)技術服務

雞傳染性法氏囊病病毒VP2抗體診斷試劑盒

喹諾酮類快速檢測試劑盒

組織芯片/微陣列定制技術服務

 

染色質免疫沉淀分析(CLIP)實驗服務

 

多因子液相芯片技術(Luminex)實驗

免疫細胞化學ICC實驗服務

ATP/ADP檢測實驗服務

蛋白雙向(2-D)電泳實驗服務

蛋白相互作用分析

堿性磷酸酶染色實驗服務

PKC活性檢測實驗

非標定量實驗

(Label-free)

 

DIGE技術實驗服務

端粒酶活性檢測實驗

細胞生長曲線的測定

掃描電鏡服務

NF-KB p65活性檢測實驗

 

慢病毒包裝實驗服務

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